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培養(yǎng)基配方
點擊次數(shù):246 更新時間:2025-05-28

培養(yǎng)基配方

常用培養(yǎng)基

1)血液瓊脂(血平板):

   【配方一】    

   成分:普通營養(yǎng)瓊脂90rot;脫纖維羊血(或兔血)10ml

   制法:將已滅菌的普通營養(yǎng)瓊脂(pH7.6>加熱融化;冷卻至50℃左右,以無菌手續(xù)加入10ml脫纖維羊血(臨用前置37℃水浴箱預(yù)溫),輕輕搖勻(勿使有氣泡),傾注于滅菌平皿內(nèi),每一平皿(直徑9 cm)1315ml或分裝試管,制成斜面;待凝固后,抽樣置37℃培養(yǎng)1824h,觀察有無細菌生長;如無菌生長,置4℃?zhèn)溆谩?/span>

   【配方二】

   成分:肉膏湯(pH7.8)800ml;硫酸鎂(493g/L)8 ml;脫纖維羊血80ml;瓊脂2123g;5.0g/L對氨基ben甲酸8ml。

   制法:將肉膏湯置三角燒瓶內(nèi),加入硫酸鎂、對氨基ben甲酸及瓊脂,混合并使液體浸濕瓊脂,121.3℃高壓滅菌30分鐘,取出冷至50℃左右,以無菌手續(xù)加入37℃水浴預(yù)溫的無菌脫纖維羊血或兔血,輕輕搖勻,傾注平板,凝固后,抽樣置37℃培養(yǎng)1824h,如無菌生長冷藏備用。

2)巧克力色血瓊脂(巧克力平板):

   成分:與血瓊脂配方相同。

   制法:與血瓊脂相同,但于培養(yǎng)基中加入血液混勻后,須再置85℃水浴1015分鐘,使血液的顏色由鮮紅轉(zhuǎn)變?yōu)榍煽肆ι?;取出并冷?/span>50℃左右,傾注平板,經(jīng)無菌試驗后存4℃?zhèn)溆谩?/span>

3)麥康凱瓊脂:分離腸道桿菌用。

   成分:蛋白胨20g;乳糖10g;10g/L的中性紅水溶液5ml;氯化鈉5g;瓊脂2025g;膽鹽5g(或牛膽酸鈉4g與去氧膽酸鈉1g),加蒸餾水1000ml

   制法:將蛋白胨、氯化鈉、膽鹽及乳糖加于500ml蒸餾水中加熱溶解;將瓊脂加于余下的500ml蒸餾水中加熱溶解;將上述兩液趁熱混合,調(diào)整pH7.4,以絨布過濾,按每瓶100ml分裝,115.6℃高壓滅菌20分鐘,待冷卻至5060℃時,每100ml培養(yǎng)基中加入經(jīng)煮沸滅菌的10g/L中性紅溶液0.5ml,混合后傾注平板。

  注意事項:膽鹽能抑制部分非病原菌及革蘭氏陽性細菌的生長,但能促進某些革蘭氏陰性病原菌的生長;因含有乳糖及中性紅指示劑,故分解乳糖的細菌(如大腸桿菌),菌落呈紅色;不分解乳糖的細菌,菌落不呈紅色。

4)伊紅美藍瓊脂(EMB):分離腸道桿菌用。

   成分:肉膏湯瓊脂(pH7.4)100ml;20g/L的伊紅水溶液(滅菌)2ml;乳糖1g6g/L的美藍水溶液(滅菌)1mI。

   制法:加熱溶化已滅菌的肉膏湯瓊脂,加入乳糖1g;待冷至50℃左右,加入伊紅及美藍溶液,混勻傾注平板,凝固后備用。

5)羅氏培養(yǎng)基:分離結(jié)核桿菌用。

   成分:磷酸二氫鉀(無水)0.96g;天門冬酰胺(天門冬素)0.72g;枸櫞酸鎂0.12g;硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.048g;純甘油(中性)2.4ml;蒸餾水120ml;馬鈴薯粉6.0g,新鮮雞蛋68個;10g/L的孔雀綠溶液8ml。

   制法:將磷酸二氫鉀至純甘油的各成份混合,置沸水中加熱溶解,加入馬鈴薯粉,邊加邊攪拌,注意勿結(jié)成塊,并繼續(xù)在沸水浴中加熱半小時,時加攪拌,待冷至65℃時加入全蛋液200ral10g/L孔雀綠溶液8ml,充分混勻,分裝于無菌試管,每管約56ml,塞上橡皮塞;置血清凝固器內(nèi)經(jīng)901h,制成斜面。

6)沙保弱氏培養(yǎng)基:培養(yǎng)真菌用。

   成分:蛋白胨10g;葡萄糖40g;瓊脂20g;蒸餾水1000ml。

   制法:上述成份混合加熱溶解(一般可不校正pH),分裝試管,121.3℃高壓滅菌15分鐘,趁熱制成斜面。如不加瓊脂即為沙保弱氏液體培養(yǎng)基。

7)葡萄糖肉湯:用于增菌。

   成分:酵母浸膏3g,構(gòu)櫞酸鈉3g;牛肉湯1000ml247g/L硫酸鎂20ml;葡萄糖3g;磷酸氫二鉀2g;5g/L對氨基ben甲酸5ml。

   制法:除葡萄糖及硫酸鎂外,其他各物混和,加熱溶解,校正pH7.6,再煮沸5分鐘,用濾紙過濾并分裝于100ml三角燒瓶中,每瓶50ml,包扎瓶口,121.3℃高壓滅菌15分鐘;將葡萄糖配成100g/L的水溶液,硫酸鎂配成247g/L的水溶液,分別高壓滅菌(葡萄糖為113℃)15分鐘,于每50ral、無菌肉湯內(nèi)加入滅菌葡萄糖及硫酸鎂水溶液各1ml混勻,于37℃培養(yǎng)48h。證明無菌生長后存于4℃?zhèn)溆谩?/span>

8)解脲支原體培養(yǎng)基:

 成分:牛肉浸液70ml;蛋白胨1.0g;NaCl 0.5g;KH2PO4 0.15g;4.0g/L酚紅0.5mI。

 制法:調(diào)pH6.0,加熱融化后濾紙過濾,121.3℃高壓滅菌,無菌加入小牛血清20ral;250g/L鮮酵母浸液10ml;青霉素20萬單位;400g/L尿素(G3濾器過濾除菌)0.5ml,分裝試管,每管4ml。如傾注平板,將上述液體培養(yǎng)基中加入瓊脂粉1.0g。

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