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豬偽狂犬gE鑒別抗體檢測(cè)試劑盒
豬偽狂犬gE鑒別抗體檢測(cè)試劑盒
更新時(shí)間:2025-02-06
訪問量: 1733
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家

豬偽狂犬 gE 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒*中垂詢!

豬偽狂犬gE鑒別抗體檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品概述:

 

 

 

豬偽狂犬 gE 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書

 

【產(chǎn)品名稱】

 

英文名稱:ELISA Kit for detection of antibody against Pseudorabies virus gE glycoprotein

 

【規(guī)格】

 

96T×2/

 

【作用與用途】

 

測(cè)定豬血清中豬偽狂 gE 抗體,用于偽狂犬病毒gE 基因缺失疫苗免疫豬與自然感染豬的鑒別診斷

 

【自備器材】

 

1.酶標(biāo)儀,雙波長(zhǎng) 450/630nm 濾光片

 

2.精q的微量移液器(單道 1-100μl0.5-10μl、多道 30-300μl

 

3.水浴箱或恒溫箱

 

4.微量振蕩器

 

5.洗液吸移裝置

 

6.一次性槍頭(10μl,200μl

 

7.去離子水

 

 

【主要組成成份】

 

 

1

PRV-gE 抗原包被板

96T×2

 

 

 

 

 

2

酶標(biāo)記物

22ml

黃色帽

 

 

 

 

3

樣本稀釋液

50ml

透明帽

 

 

 

 

4

PRV-gE-IgG 陰性對(duì)照血清

1.5ml

綠色帽

 

 

 

 

5

PRV-gE-IgG 陽(yáng)性對(duì)照血清

1.5ml

紅色帽

 

 

 

 

6

顯色劑

12ml*2

橙色帽

 

 

 

 

7

終止液

12ml

藍(lán)色帽

 

 

 

 

8

20X 濃縮洗滌液

50ml

白色帽

 

 

 

 

9

蓋板膜

2 

 

 

 

 

 

10

說明書

1

 

 

 

 

 

 

【樣本要求】

 

1本試劑檢測(cè)的樣本為豬血清,樣本應(yīng)無菌采集,2℃~8℃貯存應(yīng)不超過一周,長(zhǎng)期應(yīng)在-20℃以下保存。

 

【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】

 

1.試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實(shí)驗(yàn)前,先取出置室溫 30min,可以獲得J結(jié)果。

 

2樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作 40 倍稀釋(即:5μl 血清加 195μl 樣品稀釋液),混合均勻。

 

3.陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將陽(yáng)性對(duì)照血清和陰性對(duì)照血清作4倍稀釋(即:50μl血清加150μl樣本稀釋液),混合均勻。

4配制洗滌液:將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋 20 倍(即 1ml 濃縮洗滌液加 19ml 水),即可使用。注意:使用前要使結(jié)晶*溶解。

 

 【檢驗(yàn)方法】

 

1.加樣:根據(jù)樣本數(shù)量,取所需板條,檢測(cè)時(shí),設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各 2 孔,分別加入稀釋的陰、陽(yáng)性對(duì)照血清 100μl 于相應(yīng)孔中。其余為樣本孔,每孔加 100μl 用樣本稀釋液稀釋好的樣本(可做單孔也可雙孔檢驗(yàn))。

 2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置 37℃溫育 30 分鐘。

 3洗板:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液注滿反

應(yīng)板孔,靜置 10 秒甩出,洗滌 3 次,后

一次洗滌后在吸水紙上拍干。

 4加酶:每孔加酶標(biāo)記物 100μl。

 5溫育:加好酶標(biāo)記物的反應(yīng)板蓋好蓋板

膜,置 37℃溫育 30 分鐘。

 6洗板:同步驟 3

 7顯色:每孔加顯色劑 100μl,振蕩混勻,

37℃避光反應(yīng) 10 分鐘。

 8終止:每孔加終止液 50μl,振蕩 10 秒,

充分混勻,終止后即讀數(shù)。

 

9.讀數(shù):以450nm/ 630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè),讀取各孔吸光度值(OD 值)。

 

【結(jié)果判定】

 

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔的 OD 值。檢測(cè)結(jié)果有效的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔的平均 OD ≥0.5,陰性對(duì)照孔的平均 OD 值必須<0.1;樣品中抗體存在與否,或樣本中抗體的相對(duì)水平的高低由 S/P 值決定,S/P 值計(jì)算時(shí)按以下方式處理:

S/P=(樣本 OD450/630 值-NCx)/(PCx-NCx),

 

其中 NCx表示陰性對(duì)照孔平均 OD450/630 值

 

(0.05 以下的數(shù)值按 0.05 計(jì)算);PCx表示陽(yáng)性對(duì)照孔平均 OD450/630 值;

 

當(dāng)樣本的 S/P≥0. 25時(shí)判為陽(yáng)性;樣品 S/P 值<0.25時(shí)判為陰性;

 

【注意事項(xiàng)】

 

1.本試劑盒僅供研究使用。

 2.不要使用過期的試劑盒組分,不要把不同

批次的組分混合使用。

 3.使用試劑盒之前,一定要仔細(xì)閱讀說明書。

 4.使用前,濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫

(20~25℃),并搖動(dòng)使沉淀溶解(hao

37℃水浴鍋中加熱5~10分鐘),然后用去離

子水作 20倍稀釋(例如:50ml的濃縮洗滌液

加上 950ml 蒸餾水),混勻,稀釋好的洗滌

液在 2~8℃可以存放 7-10 日。

 5.本試劑盒應(yīng)按含有傳染性材料對(duì)待,試驗(yàn)廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或5.0g/L 次氯酸鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。

 6.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫中平

衡至潮氣干盡后方可拆開,未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封 2℃-8℃保存。未用完的液體試劑應(yīng)蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于 2℃-8℃避光保存。

 7.應(yīng)用微量移液器加入樣本及試劑,并經(jīng)常

校對(duì)其準(zhǔn)確性。

 8.加洗滌液時(shí)應(yīng)做到滿而不溢,防止孔口有

游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

 9.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應(yīng)

立即用大量清水沖洗干凈。

 

【儲(chǔ)存條件及有效期】

 

2℃~8℃避光保存,防止冷凍,有期

12 個(gè)月。

 

【生產(chǎn)日期及批號(hào)】

 

詳見包裝袋和外包裝盒。

 

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